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技術(shù)文章

雜交瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的操作方法
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雜交瘤細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的操作方法
1．材料   
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞株瘤雜交瘤細(xì)胞株
（1）經(jīng)高壓**的降植烷。
　　（2）Balb/c鼠：5~8周齡。
　　（3）雜交瘤細(xì)胞：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。
　　（4）RPMI—1640培養(yǎng)液
　　（5）新生牛血清
　　2．操作方法
　　(1)于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷，注射后1～9周內(nèi)種植細(xì)胞。
　　(2)收取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的雜交瘤細(xì)胞，用5%FCS—1640液洗滌一次，1000r/min離心10min。
　　(3)取樣，用臺(tái)盼蘭染色，計(jì)活細(xì)胞數(shù)，重新用5%FCS—1640液配成1.0×107細(xì)胞/ml的懸液。
　　(4)給注射了降植烷的小白鼠接種雜交瘤細(xì)胞，每只腹腔注射1ml（含1.0×107個(gè)細(xì)胞/ml）。
　　(5)接種后10天左右時(shí)間腫瘤體積*大，此時(shí)可由腹腔抽取腹水，每隔1~3天取1次，可取10次。血清可由腋下動(dòng)脈或心臟采血后分離。

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