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上海藍基生物科技有限公司
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**組織化學染色結果評價
對免**組織化學染色所得結果的判斷要持科學態度,根據對照實驗準確判斷陽性和陰性結果,排除假陽性和假陰性結果。為使實驗結果準確無誤,應多次重復進行實驗。*后得出科學的結論。為達此目的,首先應學會區別特異性和非特異性染色結果。非特異性染色的特點是:細胞和間質染色無區別或間質染色更強;染色無特定部位,無結構性;染色五分布規律,某一部位均勻著色;染色出現在切片的干燥部位、邊緣、刀痕或組織折疊處。排除非特異性染色之后,應確定特異性染色在組織細胞中的部位和程度,并且考慮是否有必要進行半定量測定。
《一》以抗原表達模式定位
1.細胞質內彌散性分布,多數**組織化學染色為胞質型陽性反應,如細胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
**組織化學染色(SP法。AEC顯色)
胚胎12天人員端腦背側腦室區司見波形蛋L(Vimentin)**反應陽性細胞:其胞體位于腦室區。一端伸出長突起到達軟腦膜
2.細胞核周邊胞質內分布,其判別要點是細胞核輪廓被勾畫得很清楚,如CD3多克隆抗體的染色。
3.胞漿內局限性點狀陽性反應,如CDI$抗體的染色。
4.細胞膜線性陽性反應,大多數**細胞標志物的染色均如此,如CD20。
5.細胞核陽性反應,如BrdU、Ki-67及雌、孕**受體蛋白等。
有些抗原的陽性表達可同時出現在細胞的不同部位,如細胞質和細胞膜等。
《二》陽性染色結果定量
1.計算**反應陽性細胞數方法是選擇每個樣品中10個非重疊視野,計算每個視野中的陽性細胞與總細胞數的百分比,取平均數,連續觀察和計算至少二個條件相同的樣品。得出數據經統計學處理后可在計算機MicrosoftExcel中作出柱形圖。
2.另一種方法以染色陽性強度和陽性檢出率相結合而定,一般陽性細胞數在0~25為陰性,25~50為+,50~75為++,75以上為+++。此種判定方法容易出現人為誤差,現已很少在論文中出現。
3.圖像分析系統檢測陽性結果。
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